淋巴细胞毒试验临床意义:

本试验可以作为体外测定肿瘤患者细胞免疫的指标，也可以通过测定机体免疫活性细胞杀伤肿瘤细胞的能力，来判断肿瘤患者的预后，还可以鉴定淋巴细胞的功能性亚群。

需要检查的人群：淋巴细胞毒交叉试验也称补体依赖细胞毒试验(CDC)。它是检查器官移植受者体内有无针对供者，或者供者针对受者的HLA抗体，在器官移植前一定要进行CDC检测。

淋巴细胞毒试验注意事项：

(1)在测定受检者淋巴细胞攻击肿瘤细胞的能力时，实验组中加入肿瘤细胞和受检者淋巴细胞，对照组中加入肿瘤靶细胞和培养液。若检测其它样品如肿瘤抗原或免疫原、治疗药物等与细胞免疫的关系，则应增设第3组，在此试验组中先使淋巴细胞与待测样品作用，继经洗涤后再观察此“致敏淋巴细胞”对肿瘤靶细胞的杀伤作用。此时前两组成为对照组。

(2)靶细胞与淋巴细胞的活率要处于最佳状态，一般要>90%。

(3)加入培养液中的小牛血清须先作毒性试验。

(4)接种靶细胞和淋巴细胞的计数要准确。

(5)实验组和对照组应安排在同一块板上以减少误差。

(6)培养液的pH以6.8～7.2最为适宜。

淋巴细胞毒试验检查过程：

淋巴细胞毒试验的原理：各种贴壁生长的靶细胞，当被致敏的T淋巴细胞杀伤后可失去贴壁能力，故可从贴壁靶细胞数目的减少情况判断淋巴细胞杀伤靶细胞的能力。

试剂：同形态检查法和同位素释放法。

操作方法：

（1）靶细胞的接种：选用能贴壁生长的肿瘤细胞，用Hank液洗涤后经2.5g/L胰酶消化2～3min，倒去胰酶液（细胞仍贴在瓶壁），用Hank液轻洗细胞3次，倒去Hank液。用含10%～20%小牛血清的RPMI1640液将贴壁细胞冲洗下来，用100目滤网过滤除去细胞团块，制备成1×106/ml单个肿瘤细胞悬液，用滴管吸取细胞悬液滴入40孔培养板中，每孔1滴（约含100～150个细胞），置培养板于37℃含5%CO2孵箱中20h。取出培养板甩去其中培养液，瑞氏染色后计数每10孔中平均贴壁的肿瘤细胞数，如果两组平均数相差＞1/3，表明误差太大不能使用，如果误差不大其它各培养板可进行正式试验。

（2）分离淋巴细胞：取受检者肝素抗凝血3ml，用聚蔗糖-泛影葡胺分层液分离淋巴细胞后再用Hank液洗3次，然后用RPMI1640液配成（2～3）×105/ml细胞悬液。

（3）细胞毒试验：淋巴细胞和靶细胞按200∶1比例混合，每孔中加入（2～3）×104个淋巴细胞（0.1ml体积中）约每孔再加入含20%小牛血清的RPMI1640液0.1ml，置培养板于37℃5%CO2孵箱中40h。取出培养板甩去培养液，瑞氏染色后于显微镜下计数培养板底部残留的靶细胞数。

淋巴细胞毒试验不适宜人群：

暂无禁忌。

淋巴细胞毒试验不良反应与风险：

暂无相关并发症和危害。