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硝基四唑氮蓝试验

中性粒细胞在杀菌过程中能量消耗增加,代谢中所脱的氢还原氮蓝四唑成为蓝黑色的点状或块状物,沉积于粒细胞胞质中,根据细胞内沉积颗粒判断阳性率。本试验主要用于检测中性粒细胞的胞内杀伤功能,可以用于诊断儿童慢性肉芽肿病,以及用于鉴别细菌性和病毒性感染。

基本信息

  • 检查分类:免疫检查
  • 适用性别:男女均适用 是否空腹:空腹
  • 参考价格:35元
  • 分析结果:
  • 温馨提示:本试验特异性不强,目前主要用于慢性肉芽肿和细菌系统感染的筛选。

硝基四唑氮蓝试验正常值:

正常人,一般认为10%以上者为阳性。5%~10%为NBT阴性。若NBT为阴性,则取0.5ml肝素抗凝血加10μg细菌内毒素后按上法试之,如NBT阳性细胞>29%,表示受检者的中性粒细胞吞噬功能正常,若仍为5%~10%,则属功能异常。

硝基四唑氮蓝试验临床意义:

NBT低值见于慢性肉芽肿、先天性丙球缺乏症、红斑狼疮以及使用免疫抑制剂等。此法还可用于区别细菌与病毒感染。如为病毒感染时,虽有发热,但NBT仍正常;只有细菌、真菌感染时,NBT阳性细胞增加。NBT试验还可用于器官移植后发热反应的鉴别诊断。如因细菌感染而发热,NBT值升高;但如因体内非特异性反应而发热,则NBT值保持正常。

硝基四唑氮蓝试验注意事项:

(1)肝素抗凝血和NBT应用液等量混合后保温。保温方式很重要,水浴中会使NBT还原减少。

(2)计数时,凡聚集成团或破裂的中性粒细胞和单核细胞不计在内。经常有成堆的血小板黏附在中性粒细胞上,注意区别。

(3)本试验特异性不强,目前主要用于慢性肉芽肿和细菌系统感染的筛选。

硝基四唑氮蓝试验检查过程:

取材:血液

硝基四唑氮蓝试验的测定原理:中性粒细胞在杀菌过程中能量消耗骤增、糖代谢活跃、6-磷酸葡萄糖氧化脱氢成为戊糖。所脱的氢还原淡黄色的硝基蓝四氮唑(NBT)成为蓝黑色的点状或块状颗粒,沉积于中性粒细胞的胞浆中,其折光性很强,在油镜下很易识别。

试剂:

(1)2.0g/LNBT生理盐水溶液:取NBT20mg,加于10ml生理盐水中,置80℃水浴,搅拌溶解,先用滤纸过滤,再经G6除菌,分装,放4℃冰箱保存备用。试验前新鲜配制NBT应用液,取2.0g/LNBT生理盐水溶液加等量下述缓冲液,混合后即可。

(2)pH7.20.15mol/L磷酸葡萄糖生理盐水缓冲液:0.15mol/LNa2HPO4,70ml;0.15mol/LKH2PO4,30ml;葡萄糖100mg,混合溶解,过滤,分装,55.16kPa,高压灭菌20min,置冰箱保存。

操作方法:

(1)取肝素(100u/ml)抗凝血0.1ml放入凹玻片中,加NBT应用液0.1ml和NBT应用液0.1ml,混匀。置湿盒中,37℃15min(其间振摇1次)再移室温15min。

(2)取1滴混合液,推成薄片,晾干。

(3)用甲醇固定3min,吹干,加10.0g/L沙黄水溶液染色5min(也可用50.0g/L甲基绿水溶液染色15min,或用姬姆萨-瑞氏染液染色),水洗,晾干。

(4)用显微镜检查,凡中性粒细胞的胞浆内含有斑点状或块状深蓝色物质沉着的为NBT阳性细胞,细胞核有不同程度的退行性变,细胞有时肿大。共计数100~200个中性粒细胞,计其NBT阳性细胞百分率。

硝基四唑氮蓝试验不适宜人群:

没有不适宜人群。

硝基四唑氮蓝试验不良反应与风险:

是一种安全的检查,对身体无危害。

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