在血吸虫病的免疫学诊断中,除试用过几乎所有的各种免疫学检验方法。此外,还有以血吸虫尾蚴和虫卵作为抗原的尾蚴膜试验和环卵沉淀试验。现介绍敏感性、特异性较高且使用广泛的临床常用的试验方法。
阴性反应:尾蚴体表周围无反应或仅出现颗粒状沉淀。
CHR有较高的敏感性和特异性,阳性率一般可达95%以上,且具有早期诊断价值,但似无疗效考核价值。对感染畜禽类尾蚴的稻田皮炎病人可出现交叉反应。
(1)加入虫卵数量要适当,虫卵过多或过少对反应结果都有一定影响。计算虫卵时,均不计未成熟卵和破卵。
(2)检验每批血清标本,应同时做一阳性血清对照。
(3)本试验可用于滴血滤纸代替血清进行反应,但将血滴洗脱时,血液被稀释反应强度因而下降。在我国一般不推荐干血滤纸方法。目前有采用热处理超声干卵,PVC薄膜片环卵反应以及双面胶纸条环卵反应等。
取材:血液
血吸虫尾蚴膜反应的原理:血吸虫尾蚴的分泌、排泄物质与病人血清中的特异性抗体结合,在尾蚴周围形成明显的透明膜或套膜,即为阳性反应。
试剂:冰冻干燥或热处理超声血吸虫卵,国内有成品供应。
操作方法:
(1)用熔化的石蜡在洁净的载玻片上划两条相距约20mm的直线,在蜡线之间滴加受试者血清2滴。
(2)用针尖挑取干卵100~150个加入血清中,混匀,覆盖24mm×24mm盖玻片,盖玻片四周围石蜡密封。
(3)置37℃温箱内48h后,用低倍显微镜观察反应结果。如可疑阳性应在高倍显微镜下鉴别。
(4)结果判读,典型的阳性反应是在虫卵周围出现泡状,指状或细长卷曲的带状沉淀物,遗缘较整齐,有明显的折光。泡状沉淀物须大于10μm(约相当2个细胞大小)。
①反应强度以(+)~(+++)表示。
(+++)虫卵周围出现泡状沉淀物的面积大于虫卵面积,带状沉淀物相当于或超过虫卵长径的2倍。
(++)虫卵周围出现泡状沉淀物的面积大于虫卵面积的1/2,带状沉淀物相当于或超过虫卵的长径。
(+)虫卵周围出现泡状沉淀物的面积小于虫卵面积的1/2,带状沉淀物小于虫卵的长径。
②阴性反应:虫卵周围光滑无沉淀物,或有小于10μm的泡状沉淀物及不论大小的球状(圆球形,折光稍淡,与虫卵似连非连)及影状(外形不甚规则,折光淡,高倍镜下显颗粒状)沉淀物。
阳性反应标本片要观察100个成熟虫卵,记录出现反应的卵数和反应的强度,计算环沉率。阴性者必须看完全片。
无特殊禁忌人群。
无相关记录。