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1.MTB的检出是确认结核病的主要依据。直接厚涂片抗酸染色显微镜检查快速、简便、假阳性少。镜检结果报告标准为：每300视野未检出者为(-)，每300视野内检出1～2个者报菌数;每100视野检出3～9个者为(+);每10视野检出3～9个者为(++);每视野检出1～9个者为(+++);每视野检出≥10个者为(++++)。
2.结核菌素试验(简称结素试验)旧结素(OT)是一种粗制的提取物，由MTB已死亡的液体培养基中提炼的MTB代谢产物，主要成分为结核蛋白。OT中尚含有其他抗原，注射后还可引起非特异性反应。PPD为结素纯蛋白衍生物，优于OT。经硫酸铵沉淀制成PPD-S，精纯、高效，非特异性变态反应极少见，已被WHO定为哺乳类国际标准结素。WHO委托丹麦生产的定名为PPD-RT23，被国际上广泛应用。20世纪80年代与90年代我国生产的PPD-C与BCG-PPD，两种PPD的蛋白含量均与PPD-S相近，高于PPD-RT23，目前已在国内应用。前者供卡介苗接种筛选对象、质量监测及临床辅助诊断用;后者供流行病学调查用。
结核菌素试验主要用于结核感染的流行病学调查。卡介苗接种后可呈弱阳性反应。中度阳性表示曾感染结核。我国城市居民感染率高达80%，成人结核菌素试验阳性反应无诊断意义。在3岁以下婴幼儿结核菌素试验阳性反应按活动性结核病论，成人强阳性反应提示活动性结核病可能，应进一步检查。如用1U高稀释度液作皮试呈强阳性反应，可提示体内有活动性结核灶，目前所用结素并非高度特异，与其他分枝杆菌，如奴卡菌和棒状杆菌等有共同的细胞壁抗原，亦可引起OT试验呈弱阳性反应。在急性病毒感染(麻疹、流行性腮腺炎、水痘)、HIV感染、应用糖皮质激素等免疫抑制药者、结节病、肿瘤、肾衰竭、营养不良、老年人DTH
反应衰退者均可呈现阳性反应。尚有少数极重度结核病者结素反应阴性，其机制尚不清楚。当排除上述疾病的影响因素后，特别是较高浓度的结核菌素试验(10～100U)阴性反应才能排除结核病。
3.新诊断技术
(1)新一代的BACTECMGIT960是集分枝杆菌快速生长培养、检测及药敏技术为一体的全自动分枝杆菌培养仪。MGIT依赖一种氧敏感荧光化合物检测分枝杆菌的生长，用Middlebrook7H9培养基加有硅镶嵌荧光化合物，溶解于培养基内的氧猝灭化合物的荧光。细菌接种后消耗氧，产生荧光，用长波紫外灯或紫外透射仪365nm处观察。该技术明显缩短试验的时间，据报道能累计缩短65天，有利于结核的诊断和治疗。
(2)结核病细菌学基因诊断体系：测定MTB核酸同源性序列的标记核酸片断或序列核酸探针(DNAprobe)，能使MTBDNA体外扩增的聚合酶链反应技术，以及利用直接观察细菌染色体的限制性内切核酸酶特征性带谱鉴定分离株的核酸指印技术得以应用。目前对核酸指印技术与核酸探针技术的实验室研究尚需进一步加强。
(3)血清学诊断：已在临床中应用的诊断技术有酶联免疫吸附试验(ELISA)、点免疫结合试验(dotimmunobindingassay，DIBA)、蛋白印迹法(Westernblotting)、固相抗体竞争试验(solid-phaseantibodycompetitiontest，SACT)等，但仍有许多问题要研究。
1.X线检查包括透视、X线片、CT等。有助于早期诊断，并对病变部位、范围、性质、演变情况及治疗效果做出判断。
2.内镜检查包括纤维支气管镜、胸腔镜、纤维结肠镜、乙状结肠镜、腹腔镜、膀胱镜等。对某些结核病可提供病原学和病理学诊断。
3.活体组织检查对不排菌的肺结核以及与外界不沟通的脏器的结核病，可通过组织活体检查进行病原学和病理学诊断，如肺脏、胸膜、腹膜、肝脏、淋巴结等。