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腺病毒性肺炎
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腺病毒性肺炎的检查项目有哪些?

  检查项目:聚合酶链式反应、酶联免疫吸附试验、血常规、间接免疫荧光试验

  1.血象 白细胞总数约62%病例在10.0×109/L以下,36%在(10~15)×109/L之间,分类以淋巴细胞为主,继发感染时白细胞总数及嗜中性粒细胞可以升高。血涂片检查:嗜中性粒细胞的碱性磷酸酶及四唑氮蓝染色一般较正常小儿或细菌性肺炎为低。

  2.病毒学检查 由于腺病毒感染是常见的,而且临床特征与其他病毒感染极相似,凭临床表现很难对腺病毒感染作出最后诊断,因此需要以下特异的诊断方法。

  (1)病毒分离:是最早研究病毒的方法,其成功率取决于能否采集到含有足量的活病毒样品和找到敏感的组织。采集标本的时间最好在发病当天,阳性率为86%,6~10天采集阳性率下降至15%。标本为喉、鼻、咽拭子或鼻洗液,采集到的标本迅速接种敏感细胞原代或传代的上皮细胞如人胚肾、Hela、KB或HEp-2都对腺病毒敏感,病毒感染几天至几周后出现特征性细胞病变。病变出现的早晚因病毒的型别及病毒的感染量而异。病变的特征是细胞先变圆,进而成球形并对光的折射增强,许多病变的细胞聚在一起似一串串葡萄。

  (2)双份血清血凝抑制试验:急性期和恢复期血清进行中和试验。抗体滴度4倍以上升高有诊断意义。虽仅提供一回顾性的诊断,但仍有价值。

  (3)快速诊断方法:病毒分离及血清学检查,经过数十年的研究与应用,结果较可靠,但需要时间长,仅能作为追溯性诊断,故国内外开展了快速诊断方法。

  ①免疫荧光技术:早期腺病毒性肺炎患儿的咽部脱落细胞直接、间接免疫荧光素标记抗体检查技术是早期快速诊断方法之一。取患儿鼻咽部脱落细胞制成涂片,每张涂片要有50个以上分散完整的细胞。直接法是将抗病毒的特异性抗体球蛋白标记荧光素直接同标本中的病毒抗原结合,在20W高压汞灯特制荧光显微镜下观察,阳性细胞在特异的抗原抗体相结合的部位,发生黄绿色荧光。间接法是将异硫氢酸荧光素(FITC)标记到抗病毒抗体球蛋白第2抗体上。检测抗病毒抗体与病毒抗原抗体的结合物。直接法简单,特异性强,但不如间接法敏感。间接法只需标记一种第2抗体便可检测多种病毒抗原,其敏感性较直接法更高。1979年后长春地区开展了免疫荧光技术诊断腺病毒性肺炎病毒抗原的研究,报道直接阳性率为74.4%,间接法阳性率为88.6%。

  ②免疫酶技术:为了提高敏感性,国外将标记荧光素的抗病毒抗体与同位素125I或酶结合形成放射免疫荧光技术和免疫荧光酶技术。这是近年来发展起来的新的免疫学技术。其基本原理与免疫荧光技术相同,只是借助化学方法将酶代替荧光素标记于病毒抗体球蛋白,或抗病毒抗体的第2抗体球蛋白上,这些酶标记物在保持免疫酶活性和酶学活性的前提下,可与相应的抗体或抗原特异性结合,形成酶标记的免疫复合物,结合在免疫复合物上的酶,遇到相应的底物时,催化无色的底物,使其水解、氧化或还原,生成可溶性或不溶性的有色产物。这种产物的出现反应了酶的存在,进而指示抗原抗体特异反应的发生,从而作出诊断。免疫酶技术以检测组织细胞或体液中的抗原抗体而分为:A.免疫酶染色法或免疫酶组化法:用于检测生物组织或细胞中抗原和抗体及其他成分。B.免疫酶测定法:用于检测生物体液和组织培养液中的抗原抗体及其他成分。a、酶标记抗体法:用此方法检测患儿咽部脱落细胞中的腺病毒抗原,全部操作过程只需2~4h。据长春的报道,此方法与传统实验室方法病毒分离和双份血清血凝抑制试验符合率相比,直接法83%,间接法89.7%。b、酶联免疫吸附测定法 (ELISA):此法应用分光光度计测定结果较酶标抗体法更为可靠,其敏感性与放射免疫类同。

  Salomon等做了免疫荧光、免疫酶联与组织培养3种诊断技术的比较,结果表明免疫酶联和免疫荧光两种快速诊断技术是诊断大多数呼吸道病毒的可靠方法,但对腺病毒的诊断较组织培养敏感性低。

  ③聚合酶链反应(PCR):是目前世界上最敏感和特异的分子生物学技术。可用以检测腺病毒DNA。比分离病毒敏感、快速。无论是引起肺炎的腺病毒,还是难以培养的肠道腺病毒,只要标本中有腺病毒,无论其有无感染性,均可用PCR检测到。而且,还可用于研究腺病毒的分子生物学特性和其基因的变异与致病性的关系。

  3.免疫功能测定 腺病毒性肺炎对机体的细胞免疫和体液免疫功能有不同程度的影响。病情重者细胞免疫抑制程度明显。

  (1)白细胞吞噬功能降低:降低程度与病情程度有关,恢复期有明显上升。白细胞吞噬功能的降低是与感染有关的一种暂时性抑制。

  (2)PHA皮试反应减弱:严重低反应者均为较重患儿,随着病情恢复,PHA皮试反应也可有一定程度上升。

  (3)放射性同位素渗入法:淋巴细胞转化试验在急性期3H-TdR渗入率低。病情重者降低显著。3H-TdR渗入率低反应了T细胞对PHA的增殖反应的减弱。

  (4)急性期IgM增高,IgG及IgA降低,恢复逐渐正常。

  (5)血清补体C3病情轻者偏高,病情重者偏低。

  (6)血清溶菌酶水平显著增高:在感染状态时,血液循环中嗜中性粒细胞更新率增快及单核细胞代谢活动增强,在机体的防卫机制中有一定意义。

  4.血气分析及血乳酸盐测定 对重症腺病毒性肺炎有呼吸衰竭者,有助于判断预后。根据北京儿童医院的观察认为,凡血气分析pH小于7.25、二氧化碳分压大于9.0kPa及严重低氧血症(吸入40%以上氧浓度时,氧分压低于7.0kPa)及(或)有高乳酸盐血症(血乳酸盐检测值大于正常值 2个标准差)者病死率较高。

  X线胸片改变早于肺部体征,早期肺纹理增多、模糊,继之于两肺中内带及两侧下部有大小不等的片状病灶。随着病情发展,病灶密度增高,病变增多,分布较广,有的互相融合成大片状病灶,右侧多于左侧。肺部阴影大都在2周开始消退,3~6周才完全吸收。部分病例可有胸膜反应或少量胸腔积液以及肺气肿

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