本试验测定红细胞对各种浓度低渗溶液的抵抗力。在低渗盐水中,水分透过细胞膜,使红细胞逐渐胀大破坏。红细胞的渗透性主要取决于红细胞的表面积与体积之比。表面积大而体积小者对渗盐溶液的抵抗力较大,反之则抵抗力较小(脆性增加)。球形红细胞表面积/体积比值减少,对低渗溶液特别敏感,脆性显著增加。
桑福德法:初溶(开始溶血):0.0042~0.0046(0.42%~0.46%)氯化钠溶液。
完全溶血:0.0032~0.0034(0.32%~0.34%)氯化钠溶液。
异常现象:
(1)增高:遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、先天性溶血性黄疸(家族性溶血性黄疸)等。
(2)降低:镰状红细胞性贫血、阻塞性黄疸、缺铁性贫血、地中海贫血、铅中毒、恶性贫血、脾切除术后、肝脏病。
需要检查人群:贫血,铅中毒,黄疸,肝脏异常的人群
检查时:
(1)地中海贫血的渗透脆性降低,应进行低浓度NaCl溶液的检查。
(2)严重贫血者,要把RBC配成50%浓度,黄疸者要洗红细胞。
(3)血标本在冰箱中保存不得超过6h。
1、制备不同浓度的NaCl溶液。先配置1%浓度的低渗NaCl溶液100ml,然后去口径相同的干净试管12支,编号排列在试管架上,按下表分别向各试管内加入1%NaCl溶液和蒸馏水后混匀,配置12种0.68%~0.24%不同浓度的低渗NaCl溶液
2、分别配置0.85%浓度的NaCl溶液、1.9%浓度的尿素溶液。另取3支小试管,编号13~15,分别盛2.5ml0.85%NaCl溶液。1.9%尿素溶液和蒸馏水
3、碘酒、酒精消毒皮肤后用灭菌干燥的、肝素湿润的注入器从肘正中静脉取2ml,利己混匀,将其中1ml加入试管,余血一次向15支试管内各加入1滴,轻轻混匀。
4、观察13、14、15管的变化,其余12管在室温下静置1小时,然后观察混合液的颜色和透明度。
(1)试管内液体完全变成透明红色,说明红细胞全部破裂,称完全溶血
(2)试管内液体下层为浑浊红色,上层为透明红色,表示部分虹吸包破裂,称不完全溶血。
(3)试管内下层为浑浊红色,上层为无色透明,说明红细胞全部没有破裂
5、记录试验结果。包括受试者姓名和红细胞渗透脆性范围(即最小抵抗力的NaCl溶液浓度和最大抵抗力的NaCl溶液浓度)以及13~15管的结果。
6、取第6管和第13管混合液各1滴于载玻片上,盖上盖玻片,在显微镜下观察红细胞形态。
无禁忌人群。
无并发症。