热盐水试验临床意义:

异常结果：

检查结果为阳性。

在粒细胞系统中，中幼粒细胞以下各阶段细胞的大部分，细胞核被溶解而且程度明显(++～+++)。原始粒细胞的细胞核较少被溶解或不溶解，程度也轻(+～++)。早幼粒细胞细胞核溶解情况介于二者之间。淋巴与单核细胞一般不溶解，偶见轻度溶解(+)。以溶解(+)以上的幼稚细胞>10%为诊断界限。急性粒细胞诊断符合率达78.5%，而急性单核或淋巴细胞均不符合。有助于急性白血病细胞类型的鉴别。但幼稚细胞溶解(+)以下，

热盐水试验注意事项：

检查前禁忌：检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后，应禁食。

检查时要求：

1.为保证获得完整的细胞核，第一是全程低温操作。第二是快速。第三，在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备细胞核的最关键环节。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。

2.以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。

3.进行WesternBlot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解细胞核。

热盐水试验检查过程：

1.样本处理

a.组织匀浆：称取100~200mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0mL预冷的LysisBuffer，再加入50ulReagentA，0℃冰浴中上下研磨组织20次;有未研磨开的组织，可用双层纱布过滤。

b.培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800×g5~10min离心收集细胞。计数。每次提取需要5×107个细胞，加入1.0mL冰预冷的LysisBuffer重悬细胞，再加入50ulReagentA，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨细胞20~30次。

2.将组织或细胞匀浆物转移到1.5ml离心管中，4℃，700×g离心5min。细胞核沉淀在收集管底部，弃上清。加入0.5mL冰预冷的LysisBuffer重悬沉淀;

3.取另一新离心管内加入0.5mLMediumBuffer，吸取上一步的重悬液，沿管壁小心地加入到此离心管中,置于MediumBuffer之上,4℃，700×g离心5min。将上清转移到新离心管，细胞核沉淀在管底;

5.弃上清，在细胞核沉淀中加入0.5mLLysisBuffer重悬细胞核沉，1000×g离心10min，弃上清，得较纯的细胞核沉淀;

6.用50-100μLStoreBuffer或合适的反应缓冲液重悬细胞核沉淀，立即使用或-70℃保存。

热盐水试验不适宜人群：

1、服用过甲状腺激素、甾体激素等药物的患者，因为可能会影响到检查结果，禁止近期有以上药物服药史的患者检查。

2、特殊疾病：患有造血功能减低疾病的患者，比如白血病，各种贫血，骨髓增生异常综合症等，除非该检查必不可少，尽量少抽血。

热盐水试验不良反应与风险：

1、皮下出血：由于按压时间不足5分钟或是抽血技术不过关等原因可导致皮下出血。

2、不适感：穿刺部位可能会出现疼痛、肿胀、压痛、肉眼可见的皮下瘀斑等。

3、晕血或晕针：在抽血时，由于情绪过度紧张、恐惧、反射性引起迷走神经兴奋、血压下降等导致脑供血不足引发晕针或晕血。

4、感染的风险：如果使用了不洁针头穿刺就有可能有感染的风险。