乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)是HBV核心抗原的成分,HBeAg是乙肝病毒复制的指标,其阳性提示乙肝病毒复制活跃,病毒载量高。当HBeAg转为阴性或同时伴有抗-HBe转阳时,往往伴有病毒载量的下降和肝功能的好转。但也有一些病人在出现HBeAg转阴后仍然保持病毒的活跃复制,病毒的载量和肝脏的炎症活动度仍然很高,这类病人即称为HBeAg阴性慢性乙肝。
正常为阴性。
Cutoff值计算COV=阴性对照OD值×2.1。
OD≥COV为阳性,标本OD值
注:阴性对照OD值低于O.05作0.05计算,高于0.05按实际OD值计算。
HBeAg阳性表明在肝细胞内复制活跃,血清具有高度传染性。急性乙肝时HBeAg呈短暂阳性,一般不超过10周,如持续阳性提示转为慢性。
(1)HBeAg阳性是乙型肝炎传染性的标志,检测HBeAg有助于判断HBsAg携带者传染性强弱,母婴传播的危险率及急性乙型肝炎的预后等。HBeAg消失和抗HBe出现显示乙型肝炎病情好转,但不能做为无传染性的指标,也不一定是对机体有益的标志(甲胎蛋白与抗HBe有相关性)。
(2)竞争法检测抗HBe的结果判断最好采用比色法,目测法不能正确判断临界值的样品。
取材:血液
乙型肝炎e抗原的测定原理:本试验是在预包被抗-HBe的微孔板上进行的二阶段反应。在第一阶段,将酶标抗体加入试验微孔中,并孵育一定时间。如标本中存在表面抗原便会与包被在微孔表面的抗体结合,同时与酶标抗体结合形成包被抗-HBe-HBeAg-酶标抗体固化复合物。假如标本中没有HBeAg则无法形成这种复合物,未结合的血清或血浆蛋白将在洗涤过程中被洗去。在第二阶段,加入TMP,如微孔中存在固化的复合物,则OPD被氧化形成有色的终产物,加入硫酸后这种反应将终止。
试剂:国内有商品化试剂盒供应,内含抗HBe包被反应板(条),抗HBe-HRP应用液,HBeAg试剂(中和试剂)以及阴、阳性对照血清,抗HBe阴、阳性对照血清,洗涤液,底物液及终止液等试剂。
操作方法:按试剂盒使用说明书进行操作。
(1)两步法操作:
①加样品:检测HBeAg时,在包被反应板(条)各孔内加入样品100μl,每次试验有阴、阳性对照,37℃保温2h,洗板4次。检测抗HBe时,各孔加入中和试剂50μl及样品50μl,每次试验有阴、阳性对照,37℃保温2h,洗板4次。
②加抗HBe-HRP:各孔加入抗HBe酶结合物100μl,37℃保温2h,洗板4次。
③显色:各孔加入底物液100μl,37℃保温15min后加终止液1mol/L硫酸50μl。
④结果判读:A.目测法:检测HBeAg时,无色为阴性,淡黄色至橘色为阳性。检测HBe时,橘红色为阴性,无色及淡黄色为阳性。B.比色法:在酶标仪上,以试剂空白校零点,测各孔在492nm光密度值。
(2)一步法操作:
①加样品:同时加中和试剂及抗HBe-HRP。A.检测HBeAg:在包被反应板(条)各孔内加入样品50μl及抗HBe-HRP100μl,混匀后37℃保温1h,洗板4次。B.检测抗HBe:各孔内加入样品50μl,中和试剂及抗HBe-HRP各50μl,混匀后37℃保温1h,洗板4次。
②显色和判读结果:同两步法。
一般无禁忌人群。
一般无并发症和危害。