HBcAb包括IgM和IgG抗体,早期以IgM为主,一般持续6~18周,一般作为急性HBV感染的指标;急性感染恢复期或慢性持续感染时以IgG为主,可持续存在数年。
正常为阴性。
Cutoff值计算原倍血清COV=阴性对照OD值×0.3。
1∶30稀释血清(血浆)COV=阴性对照OD值×0.5。
样品OD值≥COV为阴性,样品OD值小于COV为阳性。
HBcAb阳性可作为乙型肝炎感染期病毒在体内复制的指标。
①有助于确认处于“窗户期”(抗原消失,抗体尚未形成)的急性乙型肝炎。
②有助于发现HBsAg阴性的乙型肝炎。
③高滴度示病毒复制,低滴度时无传染性;低滴度抗-HBc和抗-HBs并存时,示对乙型肝炎有免疫力。
④用于乙型肝炎临床研究,流行病学调查,实验疫苗的安全性鉴定,各种血制品安全性监测,献血者筛选等。
⑤有助于发现HBsAg阴性的乙型肝炎感染者和携带者。
⑥乙型肝炎急性期和恢复期滴度很高,以后逐渐下降,由于乙型肝炎病毒复制或免疫记忆反应,抗-HBc可保持20年以上甚至保持终生。
(1)试剂使用前应摇匀,并弃去l~2滴后垂直滴加,注意均匀用力。
(2)从冷藏环境中取出的试剂盒应室温平衡30min再进行测试,余者应及时封存,置冰箱内储藏备用。
(3)冷藏的待查标本需置室温平衡30min,再可检测。
(4)待检标本不可用NaN3防腐。
取材:血液
乙型肝炎核心抗体的测定原理:采用基因工程重组HBcAg包被反应板,加入待查标本,同时加入抗-HBc-HRP,与抗原形成竞争结合,如待测标本中抗-HBc含量高,则抗-HBc-HRP与HBcAg结合少,加入TMB底物时显色淡,反之则显色深。
试剂:包被抗-HBs反应板及HRP-抗-HBs,阴、阳性对照血清,洗涤液、底物液等。
操作方法:
(1)实验准备:从冷藏环境中取出试剂盒,在室温下平衡30min,同时将浓缩洗涤液作1∶20稀释。
(2)加待测标本每孔0.05ml,并设抗-HBc阳性对照、抗-HBc阴性对照各2孔,空白对照1孔。
①1∶30稀释血清(血浆)检测结果代表临床意义。
②原倍血清(血浆)检测结果代表流行病学意义。
(3)加酶结合物每孔0.05ml,空白对照不加,充分混匀,置37℃孵育30min。
(4)洗板机洗板选择洗涤程序5次洗板,最后拍干。
(5)加显色剂先加显色剂A,每孔0.05ml;再加显色剂B,每孔0.05ml;充分混匀,放置37℃避光孵育15min。
(6)终止反应每孔加终止液0.05ml,混匀。
(7)测定用酶标仪读数,可选择单波长450nm(以空白孔校零)或双波长450/630,读取各孔OD值。
一般无不适合的人群。
一般无不良反映。