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1.血常规 病人血白细胞总数常增高，分类中以中性粒细胞增多明显，单核细胞并不增多。
2.脑脊液常规 脑膜炎患者脑脊液大多外观混浊，白细胞数为(100～10000)×106/L，其中2/3为多核细胞，蛋白质含量增高达0.5～3.0g/L，而糖量降低者仅占40%。未合并脑膜炎的患者脑脊液常规多为正常，或仅有轻度蛋白质含量增高及淋巴细胞增多。
3.细菌学检查 是诊断本病的关键。
(1)细菌涂片：取脓性分泌物、穿刺液、脑脊液、活组织细胞、胎儿粪便等涂片，行革兰染色检查。但据报道脑脊液镜检有2/3的病人标本为阴性。另外由于该菌形态上往往易与肺炎链球菌、流感杆菌、白喉杆菌等混淆，故须仔细鉴别。免疫荧光法比较特异灵敏，但结果也需认真判断。
(2)细菌培养：在疾病早期取血、脑脊液、骨髓、羊水、胎粪、胎盘、新生儿脐带残端、受损皮肤或黏膜、孕妇阴道排泄物等作细菌培养，可分离到致病菌。标本送检时最好注明“疑似利斯特菌病”，防止误认为是污染菌而提前抛弃，不作进一步鉴定。对本病诊断重要的一点是从上述标本中分离到细菌时应进一步作生化和动物接种，以肯定为利斯特菌。当标本中细菌种类较多时可用冷增菌的方式进行分离。标本染色后，可通过触酶试验将其与链球菌属相鉴别;在液体培养基中有动力，可将其与棒状杆菌属相鉴别。
4.血清学检查 对该菌的抗体反应主要是IgM抗体升高，双份血清抗体效价递升有助于诊断。但血清抗体检查对本病诊断价值有限，只用于流行病学研究。主要原因是由于：
(1)该菌与葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等其他革兰阳性菌具有共同抗原，常呈交叉反应，出现假阳性。
(2)血清抗体检测的灵敏度差。
(3)新生儿及免疫缺陷患者血清中的特异性抗体常不升高。
5.分子生物学检测 近年来应用核酸分子杂交技术及PCR方法来进行临床诊断，应用PCR方法可在250µl血液中测出1×104 cfu的利斯特菌。敏感性强。
常规做X线胸片、心电图、B超和脑CT等检查。