指检测人体肠道中的溶组织内阿米巴致病后血液中的原虫抗原。
酶联免疫吸附试验、间接免疫荧光法、直接免疫荧光法:阴性。
阿米巴病最可靠的诊断依据是:粪便直接涂片显微镜检查有溶组织内阿米巴原虫(滋养体或包囊),但误诊、漏诊多。用免疫法检测可弥补粪便镜检的不足。
阿米巴病的临床表现可随虫体寄生部位及宿主功能状态的不同而有很大差异。携带者(虫体仅寄居于人体肠道中)可无任何临床表现。当虫体侵犯宿主肠壁及其他组织时可产生多种临床症状,其中最常见的临床类型为阿米巴痢疾和阿米巴肝脓肿。
阳性:见于阿米巴肝脓肿、肠阿米巴病或带虫者。
1、采集时请避免挖取沾到马桶內尿液及自来水的部分;同时也请勿将粪便直接置于卫生纸或擦手纸上。
2、为避免干扰检验结果,请勿使用棉花棒挖取。
3、粪便采集量请勿过少,以避免无足够的检体以供检验。
4、若需要以化学法检测粪便潜血时,请于采集前三天避免进食红肉、肝脏及菠菜、甘蓝、花椰菜等食物,以避免造成伪阳性结果。
5、若是以免疫法检测粪便潜血时,您不需要限制饮食种类。
6、因为婴幼儿不容易一次取到足量的检体,若需要分次收集时,请将检体暂时置于冰箱冷藏保存,以避免细菌滋生。
阿米巴原虫抗原和抗体的测定原理:免疫荧光技术的原理是利用物质吸收光能后,产生激发态而发光的特性。将具有这种特性的荧光素(异硫氰酸荧光黄或罗丹明B200)用化学方法结合在特异的抗体(抗原)的分子上,又不损害其抗体或抗原活性的一种荧光显微镜下的示踪技术。抗体和抗原的结合是高度特异的,所以只要知道其中的一个因子,也就知道了另一个因子。免疫荧光技术就是利用上述两种特性,把不可见的抗原抗体的反应(一抗)与被荧光素标记的抗体(抗抗体)反应,变为肉眼可见的荧光,再根据组织学和细胞学定位来判断特异荧光所在。在荧光显微镜下我们所能见到的亮绿荧光,不是标本本身(无色)发出的,而是荧光物质受到激发后而发出的亮绿荧光。荧光标记抗体技术称荧光抗体技术,荧光标记抗原技术称荧光抗原技术。
试剂:
(1)荧光标记抗体(或抗原)。
(2)0.01mol/LpH7.2PBS缓冲液。
(3)组织或细胞基质片。
(4)缓冲甘油(pH7.2)。
(5)荧光显微镜。
(6)湿盒。
操作方法:
(1)抗原(或抗体)基质片(各种组织冰冻切片或培养细胞等)基质片从冰箱取出立即风干。使用前经无水乙醇或丙酮、甲醇等固定剂处理(根据实验要求选择固定剂)。一般固定3~15min,室温晾干。
(2)被检物(血清、脑脊液或其他渗出物等),根据需要用PBS适当稀释(1∶5或1∶10)滴于抗原基质片上,置室温或37℃温箱反应30min~1h。
(3)0.01mol/LpH7.2PBS冲洗15min(更换PBS3次)。
(4)加荧光标记抗体,置室温或37℃温箱30min~1h。
(5)PBS冲洗同(3)。
(6)缓冲甘油(pH7.2)封片,荧光显微镜镜检。
暂无禁忌人群。
暂无相关并发症和危害。