血清乳酸脱氢酶临床意义:

LDH测定常用诊断心肌梗死、肝病和某些恶性肿瘤。

(1)心肌梗死：发病10～12h升高，24～48h达高峰，8～9天后恢复正常。与CK相比，虽然酶活性出现较迟，阳性率较低，但持续时间长，且活性增高的程度与心肌梗死的病情密切相关，梗死范围越大，其酶活性越高。若LDH增高后恢复迟缓，或在病程中再次增高，提示梗死范围扩大，预后不良。

(2)肝脏疾病：急性肝炎或慢性活动性肝炎LDH常显著或中度升高。其敏感度略低于ALT。肝癌时LDH活性明显升高，尤其是转移性肝癌增高更显著。可达1000U/L。

(3)血液病：白血病、巨幼红细胞贫血、恶性淋巴瘤等LDH活性升高。

(4)其他：营养不良、横纹肌损伤、胰腺炎、肺梗塞等LDH活性也升高。

血清乳酸脱氢酶注意事项：

(1)比色法：

①乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物，但因其为水溶液，含量不够准确，且保存不当易产生酮酸类物质，抑制酶促反应。而乳酸锂为固体，稳定，易于称量。

②除二乙醇胺缓冲液外，也可用Tris或焦磷酸缓冲液，避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用，提高了阳性检出率。

③比色应在5～15min内完成，否则吸光度降低。

④结果>2500U时，可用生理盐水稀释标本后再测，其结果乘以稀释倍数。

(2)连续监测法：

①标本勿溶血，当溶血达Hb0.8g/L时，LDH活性可升高58%。

②标本于室温(25℃)保存，2天内酶活性稳定，冰箱保存酶活性降低，-20℃过夜LDH3、LDH4则全部失活。

③用血清或肝素抗凝血浆测定结果满意，草酸盐可抑制LDH活性。

④复溶后溶液变浊或初始吸光度>0.5应弃去。

⑤利用正逆双向反应均可测定乳酸脱氢酶活性，但因反应温度、底物和缓冲液浓度不同，其参考区间也有差异。以乳酸和NAD为底物，在340nm监测吸光度增高速率为正向反应，以LD-L表示;以丙酮酸和NADH为底物，监测340nm吸光度下降速率为逆向反应，以LD-P表示。正逆反应两法相比，LD-L法的主要优点是：A.正向反应底物液的稳定性比逆向反应的稳定性大，前者冰箱可保存6个月以上，而后者仅几天;B.速率反应的线性范围(吸光度对监测时间t作图)较宽;C.重复性比LD-P好。由于逆向反应速度比正向反应速度快，其参考值约为LD-L的2倍。

血清乳酸脱氢酶检查过程：

取材：血液

原理：

（1）比色法：LDH以NAD＋作氢的受体，催化乳酸脱氢，生成丙酮酸，后者与2，4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液呈红色，根据颜色深浅求出酶活性。

（2）连续监测法：LDH可催化L-乳酸生成丙酮酸，同时NAD＋还原成NADH，在340nm处吸光度的增高速率与酶活力成正比。

试剂：

（1）比色法：

①底物缓冲液（含0.3mol/L乳酸锂，pH8.8）：取乳酸锂2.88g，二乙醇胺2.1g，加蒸馏水约80ml溶解，以1mol/LHCl调pH8.8，加水至100ml。

②11.3mmol/L辅酶Ⅰ（NAD）溶液：称氧化型辅酶Ⅰ15mg，溶于20ml蒸馏水中，冰箱保存可用2周。

③1mmol/L2，4-二硝基苯肼（DNPH）溶液：称取DNPH200mg，加10mol/LHCl100ml，溶后加水至1000ml，置棕色瓶内室温保存。

④0.4mol/LNaOH溶液。

⑤1mmol/L丙酮酸标准液：称取丙酮酸钠（AR级）11.0mg，以底物缓冲液溶解并稀释至100ml，临用前配制。

（2）连续监测法：

①55mmol/L乳酸锂Tris缓冲液：称取乳酸锂5.28g，Tris6.68g，溶于800ml蒸馏水中，在37℃水浴箱中用1mol/LHCl调pH至8.9（约需46ml），加水至1000ml，冰箱保存。

②12mmol/LNAD溶液：称取NAD79.6mg，溶于10ml蒸馏水中，冰箱保存可用2周。

③基质应用液（含NAD6mmol/L）：根据当天用量将上述NAD溶液和乳酸钾Tris缓冲液等量混合即可。商品试剂盒按其说明溶解，恢复至室温25℃使用。

操作方法：

（1）比色法：按表1操作。

混匀，室温放置5min后，在440nm波长，比色杯光径1.0cm，蒸馏水调零点，读取各管吸光度，以AU-AC之差值查标准曲线，求出LDH活力单位。

血清乳酸脱氢酶不适宜人群：

一般无禁忌人群。

血清乳酸脱氢酶不良反应与风险：

1、感染：采集血液时注意无菌操作，采血处避免水液等污染，以免局部感染。

2、出血：采血后给予充分按压时间，尤其有凝血障碍，出血倾向者，避免局部皮下渗血，淤青肿胀。