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1、发作时血糖＜2.8mmol/L（50mg/dl）。
2、血清胰岛素和C肽：
低血糖时的血浆胰岛素及C肽增高，胰岛素指数（胰岛素/血糖）＞0.3，如＞1.0可肯定诊断。空腹血浆胰岛素＞200uU/ml可肯定诊断。
3、口服糖耐量试验：
典型者呈低平曲线，部分可糖耐量降低，少数呈早期低血糖或正常糖耐量曲线。
4、饥饿试验：
阳性有助诊断。空腹血糖＞2.8mmol/L者方可试验。90%以上禁食24－36h可激发低血糖。少数需禁食48－72h，并于终止禁食前2h加运动，可激发低血糖。经72h禁食未诱发低血糖者，可除外本病。
5、常规X线：
胃泌素瘤者消化道锁餐遗容可显示胃及十二指肠多发、反复发作的溃疡。
6、超声表现：
病变在胰腺边缘或胰腺内，圆形或椭圆形，肿块内呈低回声，边缘清楚。恶性胰岛细胞瘤边界不规则，内部回声不均匀。
7、CT表现：
（1）平扫胰腺内等密度肿块，多较小，可包括埋在胰腺内或局部突出于胰腺表面。
（2）由于功能性胰岛细胞瘤无论良、恶性均为多血管性、富血供肿瘤，所以增强扫描早期（肝动脉期）肿块显著强化呈高密度结节，高于周围正常胰腺。
（3）非功能性肿瘤通常较大，密度均匀或不均匀，多发于胰体、尾部，约20%出现瘤体内钙化，增强后可有强化，密度稍高于正常胰腺，中心可出现囊变。
（4）若合并局部淋巴结肿大或邻近器官受累或转移，为恶性肿瘤征象。
8、血管造影：
实质期肿瘤密度持续增高，并可见边缘清楚的肿瘤染色，是为特征性表现。