AS的诊断依据患者的易感性、病史、临床特征和影像学结果综合考虑。最常用的诊断标准是所谓的纽约标准:
1.腰椎前曲、侧弯后仰3个方向皆受限。
2.腰椎或背腰交接处疼痛史持续3个月以上。
3.胸扩受限,取第4肋间隙测量,胸扩≤2.5cm。
还可根据骶髂关节X线改变的分级(0级正常,1级可疑,2级轻微改变小的局限区有侵蚀或硬化,但关节腔宽度无改变,3级肯定或中度异常,出现侵蚀、硬化、关节腔增宽或狭窄或部分强直,4级重度异常关节全部强直)来判断。骶髂关节改变双侧3或4级,并有上述3项中之1项者可确诊。骶髂关节改变3或4级,但只1侧,或改变2级2侧并有上述第1或第2项及第3项者也可确诊骶髂关节改变3或4级双侧,但无上述3项中之任何1项者,作为疑诊病例。以上标准对诊断有一定帮助,但应全部考虑后决定。HLA-B27不能作为AS的筛选检查,因为大多数HLA-B27阳性的人并无AS,而某些AS患者HLA-B27则阴性。当临床疑诊AS而影像学难以确诊骶髂关节炎时,HLA-B27可增加AS诊断的可能性,但仍不能确诊。